Qué es un microscopio de interferencia: principios, tipos y aplicaciones

Definición y principio básico

Los microscopios de interferencia se utilizan en microscopía de interferencia. Son una variante de los microscopios de contraste de fase y emplean un prisma para dividir un haz de luz en dos. Estos haces permiten observar el espécimen mediante las diferencias en los campos causados por ambos haces.

Los microscopios de interferencia son más sensibles que los de contraste de fase, lo que ayuda a eliminar luz parásita. Tienen aplicaciones en biología, cristalografía, mineralogía y química.

Objetivo: visualizar microorganismos transparentes

A veces los microorganismos son difíciles de ver por ser transparentes y reflejar/refractar poca luz, dificultando su distinción del fondo. Con el desarrollo de microscopios de contraste de fase e interferencia, organismos vivos sin teñir pueden observarse con claridad. Los microscopios de interferencia eliminan los halos y luz extra del contraste de fase, logrando imágenes aún mejores.

Microscopía de contraste de fase (antecesora)

En microscopía de contraste de fase, microorganismos sin teñir son visibles incluso con la poca luz que reflejan. Al pasar la luz a través de diferentes estructuras, se produce refracción. Los microscopios de contraste de fase amplifican estas diferencias y las convierten en diferencias de intensidad lumínica.

Microscopía de interferencia

Los microscopios de interferencia toman luz del condensador y usan un prisma para dividirla en dos haces:

• Haz objeto: atraviesa el espécimen y el objetivo.
• Haz de referencia: atraviesa otro objetivo sin tocar el espécimen.

Las diferencias entre ambas imágenes revelan detalles. Si se usa luz blanca, distintas partes del espécimen pueden aparecer coloreadas.

Microscopía de interferencia diferencial (DIC o Nomarski)

Variación llamada microscopía de interferencia diferencial de Nomarski (DIC). Usa dos haces producidos por una sola luz polarizada. A diferencia del microscopio de interferencia estándar, cada haz atraviesa una parte diferente del espécimen. Al recombinarse, generan una imagen 3D con efecto de relieve.

Microscopía de luz polarizada

El microscopio de polarización es otro tipo avanzado de microscopio de interferencia. Puede producir imágenes de mayor calidad que campo oscuro, campo claro, contraste de fase e interferencia estándar. Lo logra usando:

• Un polarizador entre la fuente de luz y el espécimen.
• Un analizador (segundo polarizador) entre la apertura posterior del objetivo y los tubos de observación.

El polarizador produce dos componentes de onda individuales que se recombinan posteriormente.

Aplicaciones principales

• Biología celular: observación de células vivas sin teñir.
• Cristalografía y mineralogía: análisis de estructuras cristalinas.
• Ciencia de materiales: estudio de tensiones internas en polímeros y cristales.